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奈米所   陳坤麟老師

本研究中，我們設計了基於bk7玻璃基板的1 cm×1 cm miRNA檢測晶片。實驗主要分為兩個部分：試劑的合成和晶片的官能化。首先，採用水熱法合成Fe3O4磁性奈米粒子(MNPs)，並披覆一層金種子形成Fe3O4@Au MNPs。在磁場的作用下，Fe3O4@Au MNPs會產生法拉第磁光效應，因此，我們使用自平衡法拉第磁光系統進行檢測，因為系統採用差分檢測技術來，將兩個幅度相等、相位相反的信號相減以消除共模雜訊，使得檢測過程更加穩定。 我們設計了兩個特定的硫醇化探針SH-probe 1和SH-probe 2，以用來檢測 DNA-135a-5p。SH-probe 1固定在晶片上，而SH-probe 2會嫁接於Fe3O4@Au MNPs表面，以作為DNA-135a-5p的檢測試劑。首先將目標物DNA-135a-5p與試劑混合孵育1小時，接著，將官能化晶片浸至混合液中，此時，DNA-135a-5p的3'端與晶片上的SH-probe 1接合，而DNA-135a-5p的5'端與試劑中的SH-probe 2接合。隨著目標物DNA-135a-5p濃度的增加，越多的Fe3O4@Au MNPs將被接於晶片上，使得法拉第旋轉角變化越大。 根據實驗結果分析，本研究的DNA-135a-5p晶片檢測方法實現了0.708 aM的檢測極限(LOD)、測量時間為2小時、生產成本僅需3美元。 因此，本研究具有靈敏度高、檢測時間短、成本低三大優勢。並且目前已與台中榮總合作，拿到實際檢體進行檢測，希望未來本技術能夠應用於檢測阿茲海默症患者血清中的miR-135a-5p。