植物基因編輯載體、植物基因編輯方法及重組農桿菌
113PF0007本發明提供一種植物基因編輯載體、植物基因編輯方法和重組農桿菌,植物基因編輯載體包含非結構蛋白表達卡匣、CRISPR/Cas9表達卡匣以及外鞘蛋白表達卡匣。非結構蛋白表達卡匣包含二第一啟動子、第一核酸片段和第二核酸片段。CRISPR/Cas9表達卡匣包含第二啟動子、 Cas9基因和gRNA序列,其中gRNA序列與植物之目標基因之特定序列相對應。外鞘蛋白表達卡匣包含第三啟動子和第三核酸片段。藉此,本發明之植物基因編輯載體可在植物的細胞中同時表達Cas9蛋白和gRNA,以確保Cas9蛋白與gRNA的結合,而達到高效率精準的基因編輯,並得到無病毒且非轉基因的基因編輯植株。
生產口蹄疫病毒胜肽疫苗的Nicotiana benthamiana 轉殖株系
穩定表達重組病毒顆粒BVP1之Nicotiana benthamiana基因轉植株系係以重組之竹嵌紋病毒(recombinant Bamboo mosaic virus, rBaMV)作為載體,將各種血清型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)外鞘蛋白(VP1)之抗原決定位構築於重組竹嵌紋病毒基因體,經植物基因轉殖,篩選而出。由轉殖株系所生產的BVP1-97能引起豬隻體液及細胞免疫反應,並有效保護豬隻抗口蹄疫病毒感染。各種血清型口蹄疫病毒轉殖株系列,能有效率的在植株中表現重組病毒顆粒BVP1,利用轉基因植物衍生之懸浮細胞亦可作為生物反應器生產口蹄疫病毒疫苗,可達安全、迅速、低成本的目的。
閱讀詳細內容基因轉殖及懸浮細胞生產重組病毒蛋白及顆粒的方法
本技術平台以重組之竹嵌紋病毒(recombinant Bamboo mosaic virus, rBaMV)作為疫苗載體,經植物基因轉殖,建立表達病原抗原之重組蛋白或病毒顆粒。以口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)外鞘蛋白(VP1)之抗原決定位構築之重組竹嵌紋病毒BVP1,能引起豬隻體液及細胞免疫反應,並有效保護豬隻抗口蹄疫病毒感染。此BaMV表現系統為一新的疫苗技術平台可用於表現其他病原抗原,形成新的重組病毒或蛋白質疫苗以對抗病原體的入侵。竹嵌紋病毒載體系統能有效率的在植株中表現外源蛋白,同時利用轉基因植物或其衍生之懸浮細胞作為生物反應器生產疫苗可達安全、迅速、低成本的目的。
閱讀詳細內容台灣藜殼萃取物用以改善代謝性疾病及調控腸道菌相之用途
台灣藜殼粗萃物可以顯著保護腸道緊密連結蛋白ZO-1及Occludin免於高脂飲食造成的損傷,進而減少LPS進入肝臟及全身血液循環以降低脂肪性肝炎。同時,腸道菌結果顯示台灣藜殼粗萃物可以改善HFD誘導之腸道菌豐富度及歧異度下降,並提升益生菌屬豐富度以達到減緩高血糖症、肥胖症及非酒精性脂肪肝之功效。本研究進一步使用小鼠正常肝細胞AML12(Alpha mouse liver 12)油滴累積細胞模型進行篩選,發現台灣藜殼粗萃物中二十六烷醇(Hexacosanol)能有效抑制油滴形成。
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