提供作物廣譜病毒抗性的包含木瓜環斑病毒輔助組分蛋白酶基因的基因轉移載體及其應用
104PA1001T本發明是包含控制序列以及與該控制序列可操縱連接的木瓜環斑病毒(Papaya ringspot virus，PRSV)輔助組分蛋白酶基因(HC-Pro基因)的編碼序列片段的重組載體。本發明也提供重組微生物。本發明也提供一種使植物對病毒具有抗性的方法。本發明也提木瓜環斑病毒輔助組分蛋白酶的全長基因或其基因片段用於製造對病毒具有抗性的植物的用途。本發明以木瓜環斑病毒HC-Pro基因為靶來攻擊病毒的策略，可瓦解木瓜環斑病毒對抗植物宿主防禦反應的能力，避免因轉基因被基因沉默後而消失抗性的問題，並提供轉基因植物對於不同木瓜環斑病毒株系病毒的廣譜抗性，使所產生的轉基因植物具有跨地理區域性的應用價值。
提供作物廣泛性抗病毒性狀之木瓜輪點病毒協同性蛋白酶基因轉殖載體及其應用
102PA1003T本發明係一種用於提供植物對病毒之抗性的重組載體，其係包含一控制序列以及一與該控制序列可操作的連接的木瓜輪點病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)協同性蛋白酶基因(helper-component protease gene,HC-Pro gene)之編碼序列片段(coding sequence fragment)。本發明亦提供一種重組微生物。本發明亦提供一種使植物對病毒具有抗性的方法。本發明亦提供一種木瓜輪點病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)協同性蛋白酶(helper-component protease,HC-Pro)的全長基因或其基因片段用於製造一對病毒具有抗性的植物體的用途。本發明係以木瓜輪點病毒HC-Pro基因為標的來攻擊病毒之策略，可瓦解木瓜輪點病毒對抗植物寄主防禦反應的能力，避免因轉基因(transgene)被基因沉寂(gene silencing)後而消失抗性的問題，並提供基因轉殖植物(transgenic plant)對於不同木瓜輪點病毒株系病毒的廣泛抗性，使所產生的基因轉殖植物具有跨地理區域性的應用價值。
具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系18-2-4之核酸分子及其檢測方法及應用
102PA1002T本發明係提供具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系18-2-4之核酸分子。本發明亦提供一種用於檢測基因轉殖木瓜品系18-2-4的方法，其包括：提供一木瓜核酸樣品以及一引子對；令該木瓜核酸樣品與該引子對形成一聚合酶鏈鎖反應混合物，進行擴增反應，得到一擴增反應產物；以及偵測擴增反應產物，其中當有一預定大小的擴增片段存在，則代表該樣品含有基因轉殖木瓜品系18-2-4之DNA。本發明亦提供用於檢測基因轉殖木瓜品系18-2-4的引子、探針以及套組。前述序列、方法、引子以及套組有助於符合法規要求、智慧財產權保護及迅速篩選出純合子基因轉殖子代。
具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系16-0-1之核酸分子及其應用
100PA1002T本發明係提供具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系16-0-1之核酸分子。本發明亦提供一種用於檢測基因轉殖木瓜品系16-0-1的方法，其包括：提供一木瓜核酸樣品以及一引子對；令該木瓜核酸樣品與該引子對形成一聚合酶鏈鎖反應混合物，進行擴增反應，得到一擴增反應產物；以及偵測擴增反應產物，其中當有一預定大小的擴增片段存在，則代表該樣品含有基因轉殖木瓜品系16-0-1之DNA。本發明亦提供用於檢測基因轉殖木瓜品系16-0-1的引子、探針以及套組。前述序列、方法、引子以及套組有助於符合法規要求、智慧財產權保護及迅速篩選出純合子基因轉殖子代。
具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系16-0-1之核酸分子及其應用
100PA1001T本發明係提供具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系16-0-1之核酸分子。本發明亦提供一種用於檢測基因轉殖木瓜品系16-0-1的方法，其包括：提供一木瓜核酸樣品以及一引子對；令該木瓜核酸樣品與該引子對形成一聚合酶鏈鎖反應混合物，進行擴增反應，得到一擴增反應產物；以及偵測擴增反應產物，其中當有一預定大小的擴增片段存在，則代表該樣品含有基因轉殖木瓜品系16-0-1之DNA。本發明亦提供用於檢測基因轉殖木瓜品系16-0-1的引子、探針以及套組。前述序列、方法、引子以及套組有助於符合法規要求、智慧財產權保護及迅速篩選出純合子基因轉殖子代。
提供植物抗雙重抗木瓜輪點病毒及木瓜畸葉嵌紋病毒性狀的重組載體、方法及其應用
099PA0005本發明係一種用於提供植物抗雙重病毒之抗性的的重組載體，其係包含一控制序列以及一與該控制序列可操作的連接的重組基因，該重組基因係包括一木瓜輪點病毒(Papaya ringspot virus, PRSV)鞘蛋白基因片段以及一木瓜畸葉嵌紋病毒(Papaya leaf-distortion mosaic virus, PLDMV)鞘蛋白基因(coat protein gene, CP gene)片段。本發明亦提供一種衍生自該重組載體的重組微生物。本發明亦提供一種使植物對病毒具有抗性的方法。本發明係提供植物對於木
提供作物廣泛性抗病毒性狀之木瓜輪點病毒協同性蛋白酶基因轉殖載體及其應用
099PA0001本發明係一種用於提供植物對病毒之抗性的重組載體，其係包含一控制序列以及一與該控制序列可操作的連接的木瓜輪點病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)協同性蛋白酶基因(helper-component protease gene,HC-Pro gene)之編碼序列片段(coding sequence fragment)。本發明亦提供一種重組微生物。本發明亦提供一種使植物對病毒具有抗性的方法。本發明亦提供一種木瓜輪點病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)協同性蛋白酶(helper-component protease,HC-Pro)的全長基因或其基因片段用於製造一對病毒具有抗性的植物體的用途。本發明係以木瓜輪點病毒HC-Pro基因為標的來攻擊病毒之策略，可瓦解木瓜輪點病毒對抗植物寄主防禦反應的能力，避免因轉基因(transgene)被基因沉寂(gene silencing)後而消失抗性的問題，並提供基因轉殖植物(transgenic plant)對於不同木瓜輪點病毒株系病毒的廣泛抗性，使所產生的基因轉殖植物具有跨地理區域性的應用價值。
鑑定番茄斑點萎凋病毒屬（Tospovirus genus）之西瓜銀斑病毒血清群病毒（WSMoV-serogroup tospoviruses）之單株抗體及其製備方法與應用
098PT310C番茄斑萎病毒 (Tospovirus) 屬為Bunyaviridae科中唯一感染植物之一屬，具有脂質外套膜的球型病毒顆粒中內含三條負極性及雙極性之基因體RNA。此類病毒 (tospoviruses) 可感染至少超過82科 (family) 900多種 (species) 單子葉與雙子葉植物，並危害多種重要經濟作物，為一全球重要性的植物病原病毒，因而受到國際間學者的重視。由於tospoviruses藉由薊馬 (thrips) 以永續性的方式傳播，其病毒顆粒極不穩定且遺傳變異性大，因此病毒繁殖困難且其蛋白產物
具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系18-2-4之核酸分子及其檢測方法及應用
098PF249本發明係提供具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系18-2-4之核酸分子。本發明亦提供一種用於檢測基因轉殖木瓜品系18-2-4的方法，其包括：提供一木瓜核酸樣品以及一引子對；令該木瓜核酸樣品與該引子對形成一聚合酶鏈鎖反應混合物，進行擴增反應，得到一擴增反應產物；以及偵測擴增反應產物，其中當有一預定大小的擴增片段存在，則代表該樣品含有基因轉殖木瓜品系18-2-4之DNA。本發明亦提供用於檢測基因轉殖木瓜品系18-2-4的引子、探針以及套組。前述序列、方法、引子以及套組有助於符合法規要求、智慧財產權保護及迅速篩選出純合子基因轉殖子代。
具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系16-0-1之核酸分子及其檢測方法及應用
098PF248本發明係提供具有廣泛性抗木瓜輪點病毒特性的基因轉殖木瓜品系16-0-1之核酸分子。本發明亦提供一種用於檢測基因轉殖木瓜品系16-0-1的方法，其包括：提供一木瓜核酸樣品以及一引子對；令該木瓜核酸樣品與該引子對形成一聚合酶鏈鎖反應混合物，進行擴增反應，得到一擴增反應產物；以及偵測擴增反應產物，其中當有一預定大小的擴增片段存在，則代表該樣品含有基因轉殖木瓜品系16-0-1之DNA。本發明亦提供用於檢測基因轉殖木瓜品系16-0-1的引子、探針以及套組。前述序列、方法、引子以及套組有助於符合法規要求、智慧財產權保護及迅速篩選出純合子基因轉殖子代。
鑑定番茄斑點萎凋病毒屬（Tospovirus genus）之西瓜銀斑病毒血清群病毒（WSMoV-serogroup tospoviruses）之單株抗體及其製備方法與應用
095PC047番茄斑萎病毒 (Tospovirus) 屬為Bunyaviridae科中唯一感染植物之一屬，具有脂質外套膜的球型病毒顆粒中內含三條負極性及雙極性之基因體RNA。此類病毒 (tospoviruses) 可感染至少超過82科 (family) 900多種 (species) 單子葉與雙子葉植物，並危害多種重要經濟作物，為一全球重要性的植物病原病毒，因而受到國際間學者的重視。由於tospoviruses藉由薊馬 (thrips) 以永續性的方式傳播，其病毒顆粒極不穩定且遺傳變異性大，因此病毒繁殖困難且其蛋白產物
蕈狀芽孢桿菌防治作物銹病的配方與應用技術
利用南方型玉米銹病菌( Puccinia polysora ) 夏孢子發芽及感染玉米幼苗技術評估30種無機與有機化合物及8種農用資材的抑菌與防病功效，隨後將有效的資材分別與BM02 醱酵濾液調配成多組配方醱酵液，逐一測試它們對於夏孢子發芽與防治玉米銹病的影響，結果發現BM-C2、BM-C2P及BM-C2U等三組配方醱酵液的抑菌與防病效果最佳；其中以500倍BM-C2稀釋液與夏孢子懸浮液同時施用在玉米葉片，可抑制銹病的罹病程度達90%左右。在接種銹病菌夏孢子前，將300倍BM-C2稀釋液分別以噴灑、浸種及澆灌等施用方式處理玉米植株，證明三種施用方法皆可降低玉米銹病的發生。將BM-C2拓展應用於其他作物葉部病害的防治試驗，證明BM-C2亦可防治蔥銹病及胡瓜露菌病。在草莓田施用BM-C2之防治試驗，證實澆灌BM-C2除可降低草莓萎凋病50%的發病率外，亦可促進草莓苗的生育與提高果實的產量。本研究成功改良蕈狀芽孢桿菌BM02醱酵濾液成為BM-C2製劑，除具有效防治玉米與蔥銹病、胡瓜露菌病及草莓萎凋病等作物病害外，尚且具有促進作物生育及提高產量的功效。
閱讀詳細內容蕈狀芽孢桿菌( Bacillus mycoides )NP02製劑誘導蔬菜種苗抗病的技術
蕈狀芽孢桿菌(Bacillus mycoides) NP02利用5% (w/v)豆漿培養四天後，以種子浸泡或幼苗澆灌方式處理胡瓜與甜瓜種子或幼苗後，發現兩種方式均可顯著促進胡瓜與甜瓜幼苗根系發育外，尚可有效防治胡瓜猝倒病及甜瓜鐮孢菌病害。種子浸泡處理NP02菌株可顯著提高胡瓜苗鮮重及株高分別約1.73倍與1.58倍；且可增加甜瓜苗鮮重1.62倍與株高2.11倍。至於病害防治方面，NP02可有效降低鐮孢菌感染甜瓜幼苗達35%以上；並可減少番茄萎凋病罹病度約46%及抑制胡瓜幼苗發生猝倒病約35%；此外，NP02菌株亦可促進白菜、甘藍、萵苣及甜椒等幼苗的發育。在特殊培養基質中培養NP02菌株120小時後，可大量產生脂質胜肽，該脂質胜肽物具有顯著抑制猝倒病菌（Pythium aphanidermatum）產孢與破壞游走孢子的功效。歸言之，利用NP02菌株研製而成的微生物製劑可誘導蔬菜抗病外，尚可培育健康蔬菜種苗。
閱讀詳細內容短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus )PMB102製劑配方組成與其防治作物病害的功效
短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus )PMB102可抑制百合灰黴病菌、芒果炭疽病菌、十字花科蔬菜炭疽病菌、十字花科蔬菜黑斑病菌及萵苣褐斑病菌的孢子發芽。 探究PMB102的營養需求時，發現氮素源：丙氨酸、精氨酸、鳥氨酸或脯氨酸等， 配合碳素源：阿拉伯醣、葡萄糖、甘露醇或麥芽醣等所組成之培養液，皆具有促進PMB102抑制病原菌孢子發芽的效果。利用黃豆粉、牛肉煎汁及糖蜜組成R3配方所 研製的PMB102植物保護製劑，可有效防治百合灰黴病、芒果炭疽病及白菜炭疽病，並可促進白菜的生育。利用聚合脢連鎖反應技術偵測PMB102，發現它擁有抑菌的Surfactin基因（sft gene），並證實Surfactin是PMB102植保製劑的抑菌主要指標成分。
閱讀詳細內容防治十字花科蔬菜病害的乳酸菌植物保護製劑製程
由辣榨菜、泡菜等醃製食品中分離出Lactobacillus pentosus J02及Leuconostoc fallax J13兩株菌株，分別與軟腐病菌Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum混合接種於蘿蔔塊根後，發現具有抑制蘿蔔軟腐病的功效。將J02及J13培養於MRS (De Man , Rogosa and Sharpe) 培養基發酵後添加1% (w/v)的AG素，結果顯示其200與400倍稀釋液均可有效抑制軟腐病菌為害蘿蔔的塊根。採用MRS培養基的組成配方作為基礎，選擇以售價便宜的碳氮素源逐一替代測試，結果顯示MRS培養基中的氮碳源改為1.5% (v/v)魚漿及1.5% (v/v)甘油培養Lac. pentosus J02發酵三天，可有效抑制蘿蔔軟腐病的發生；至於Leu. fallax J13培養在MRS基質的氮碳源改以1.5% (v/v)魚漿及0.5% (w/v)蔗糖後，培養五天的發酵液具有最佳防治蘿蔔軟腐病的效果。此外，J02發酵液添加AG素的400倍液亦可防治軟腐病菌為害甘藍葉柄。進一步，測試J02發酵液添加AG素對甘藍種子發芽的影響，結果顯示J02發酵液添加AG素的稀釋倍數在400倍以下會抑制甘藍根系的發育，惟稀釋800倍液卻可促進根系的生長。將J02發酵液應用於防治十字花科蔬菜其他病害，結果證明J02發酵液添加AG素亦可有效抑制黑斑病菌、炭疽病菌、黃葉病菌、白絹病菌、黑腐病菌及軟腐病菌的發芽或生長。以J02發酵液添加AG素之200倍稀釋液施用於4星期大的甘藍植株可使黑斑病罹病度降低約30%。在接種前一天、接種同一天、接種後一天分別噴佈J02發酵液添加AG素之200倍稀釋液於甘藍植株，結果發現接種黑斑病菌同一天施用發酵液防治甘藍黑斑病的效果最為優異。施用不同次數對黑斑病與黑腐病的防治效果試驗中，以每週施用J02發酵液添加AG素之200倍稀釋液一次，連續三次可有效降低黑斑病與黑腐病的罹病度約20-30%。歸言之，本研究證明以乳酸菌J02搭配AG素之發酵液可有效防治軟腐病、黑斑病及黑腐病害的發生。
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